Annexes de l'évaluation préalable finale Approche pour le secteur pétrolier

220 à 460

100 (immobilisation à 10 %)

Étude sur l'exposition par voie cutanée : des doses de 2 000, 4 000, 8 000, 20 000 ou 40 000 mg/kg p.c. par jour ont été appliquées sur la peau rasée de la région interscapulaire de souris B6C3F₁ mâles et femelles (5 animaux par sexe par dose) pendant 14 jours consécutifs. Des lésions cutanées caractérisées par une acanthose, une hyperkératose, une parakératose modérées, accompagnées d'un infiltrat cellulaire inflammatoire mixte modéré dans le derme supérieur ont été observées à toutes les doses. Le décès de toutes les souris est survenu entre les jours 7 et 12 à la dose la plus élevée (NTP, 1986).

Étude sur l'exposition par voie cutanée : des doses de 425, 818 ou 1 625 mg/kg p.c. par jour (11,9, 22,9 ou 45,5 mg par jour)^{Note de bas de page Annexe G Tableau G-1 [c]},^{Note de bas de page Annexe G Tableau G-1 [d]} ont été appliquées sur des souris C3Hf mâles et femelles, à raison de 3 jours par semaine pendant 40 semaines. Une diminution du poids corporel (4 à 21 %), une augmentation du poids de la rate (mâles et femelles), une augmentation du poids relatif des reins (femelles) et une diminution du poids relatif des reins (mâles) ont été observées à des doses de 818 mg/kg p.c. par jour (Schultz et al., 1981).

Étude sur l'exposition par voie cutanée : des doses de 694 ou 1 111 mg/kg p.c. par jour (50 µL dilués à 50 % p/v dans du cyclohexane ou 50 µL sans dilution)^[c],^{Note de bas de page Annexe G Tableau G-1 [e]},^{Note de bas de page Annexe G Tableau G-1 [f]} ont été appliquées sur la peau rasée interscapulaire de souris C3Hf/Bd mâles et femelles (15 animaux par sexe par dose), à raison de 3 fois par semaine pendant 60 semaines. Une hyperkératose, une alopécie et une ulcération au site d'application, ainsi qu’une augmentation de la consommation quotidienne d'eau (peut-être en raison de l'augmentation de la perte d'eau) et une augmentation de la production de l'urine ont été observées à toutes les doses. Une incidence accrue de lésions rénales macroscopiques (les reins affectés étaient plus petits, pâles et nodulaires) a été observée chez les femelles exposées à la dose la plus élevée (Easley et al., 1982).

Étude sur l'exposition par voie cutanée : des doses de 250, 500, 1 000, 2 000 mg/kg p.c. par jour (diluées dans 0,2 mL d'acétone) ou de 4 000 mg/kg p.c. par jour (sans dilution) ont été appliquées sur la peau rasée de la région interscapulaire de souris B6C3F₁ mâles et femelles (10 animaux par sexe par dose), à raison de 5 jours par semaine pendant 13 semaines. Une réduction du poids corporel (8 à 13 %) a été observée chez les mâles à toutes les doses. On a observé une incidence accrue de dermatoses, accompagnées d'une légère dermatite à la dose la plus élevée. Une hématopoïèse extramédullaire dans la rate et une caryomégalie dans le foie ont été observées à une dose non précisée (NTP, 1986).

Étude sur l'exposition par voie cutanée : une dose de 8 000 mg/kg p.c. par jour (8 mL/kg par jour)^{Note de bas de page Annexe G Tableau G-1 [g]},^{Note de bas de page Annexe G Tableau G-1 [h]} a été appliquée sur des lapins néo-zélandais blancs mâles et femelles (4 animaux par sexe) pendant une période de 5 jours, suivie de 2 jours de repos puis de 5 jours supplémentaires d'exposition. Une grave irritation cutanée et des lésions (acanthose, inflammation chronique, encroûtage, congestion cutanée, œdème cutané et hyperkératose) ont été observées au site d'application. Les décès (25 % des cas) sont survenus après une exposition unique. Une baisse de la consommation d'aliments, une légère hyperplasie épithéliale de la muqueuse de la vessie (4 lapins sur 8), une légère dégénérescence vacuolaire centrolobulaire du foie (3 lapins sur 8) et une grave nécrose multifocale du foie (7 lapins sur 8) ont été observées (API, 1980a, 1980b, 1980c).

Étude sur l'exposition par voie cutanée : des doses de 1 070, 2 140 ou 2 675 mg/kg p.c. par jour (1, 2 ou 2,5 mL/kg par jour)^[g],^[h]ont été appliquées à des rats Sprague-Dawley mâles et femelles (4 animaux par sexe et par dose) pendant une période de 5 jours, suivie de 2 jours de repos, puis de 5 jours supplémentaires d'exposition. Une irritation cutanée significative (acanthose, inflammation chronique et aiguë, encroûtage, pyodermite profonde, congestion, œdème, hyperkératose et nécrolyse épidermique) a été observée au site de traitement pour toutes les doses. Une nécrose multifocale et une dégénérescence vacuolaire centrolobulaire du foie ont également été rapportées à toutes les doses (API, 1980d).

Étude sur l'exposition par voie cutanée : des doses de 496, 992 ou 2 480 mg/kg p.c. par jour (0,5, 1,0 ou 2,5 mL/kg par jour) ont été appliquées à des rats Sprague-Dawley mâles et femelles (10 animaux par sexe par dose), à raison de 5 jours par semaine pendant 28 jours. Une irritation cutanée minime et réversible a été observée à toutes les doses. Une hyperkératose (légère) a été observée au site d'application à la dose la plus élevée. Une augmentation significative du poids relatif du foie a été observée pour les deux sexes à toutes les doses. Aucun autre effet général lié à la substance n'a été observé (UBTL, 1987).

Étude sur l'exposition par voie cutanée : des doses de 496, 992 ou 1 984 mg/kg p.c. par jour (0,5, 1,0 ou 2,0 mL/kg par jour)^[h],^{Note de bas de page Annexe G Tableau G-1 [i]} ont été appliquées à des rats Sprague-Dawley mâles et femelles (10 animaux par sexe par dose), à raison de 5 jours par semaine pendant 4 semaines. De légères lésions cutanées histopathologiques (acanthose et hyperkératose) ont été observées à des doses de 1 984 mg/kg p.c. chez les deux sexes. Une réduction du gain de poids corporel (peut-être liée à la dose) a été observée chez les mâles (réduction à 992 mg/kg p.c. et baisse statistiquement significative à 1 984 mg/kg p.c.). Une anémie liée à la substance d'essai a été observée (augmentation du poids absolu et relatif de la rate sans anomalie pathologique splénique apparente), tout comme une diminution des indices érythrocytaires (nombre de globules rouges, taux d'hématocrite [%] et taux d'hémoglobine) pour les trois doses chez les deux sexes (UBTL, 1988).

Plus faible DMENO par voie cutanée (court terme) = 1 mg/kg p.c. par jour d'après une diminution liée à la dose du poids corporel maternel, du gain de poids corporel et du poids de l'utérus gravide, ainsi que présence d'exsudats vaginaux rouges. On a appliqué des doses de 0,05, 1,0, 10, 50 ou 250 mg/kg p.c. par jour sur la peau rasée du dos de rates CD gravides durant les jours de gestation 0 à 19 (Hoberman et al., 1995).

Autre étude sur l'exposition par voie cutanée (court terme) : On a appliqué des doses de 8, 30, 125 ou 500 mg/kg p.c. par jour ou de 4, 30, 125 ou 500 mg/kg p.c. par jour sur la peau rasée du dos de rates Sprague-Dawley gravides (15 par dose) durant les jours de gestation 0 à 19 (la dose de 4 mg/kg p.c. par jour a été administrée en appliquant 8 mg/kg p.c. tous les deux jours). On a constaté une composition chimique anormale du sérum et une réduction du gain de poids corporel et de la consommation de nourriture, ainsi que des exsudats vaginaux à une dose 8 mg/kg p.c. par jour (appliquée tous les deux jours) [Mobil, 1990; Feuston et al., 1997).

DMENO par voie cutanée (subchronique) = 8 mg/kg p.c. par jour d'après une augmentation du poids relatif du foie (rats mâles et femelles) et une augmentation absolue du poids du foie (femelles). Des doses de 8, 30, 125, 500 ou 2 000 mg/kg p.c. par jour ont été appliquées sur la peau rasée du dos de rats Sprague-Dawley, 5 fois par semaine pendant 13 semaines. On a également observé une mortalité accrue, une diminution du poids corporel et du poids du thymus ainsi que des paramètres chimiques du sérum et hématologiques anormaux à des doses non précisées (Feuston et al., 1994).

DMENO par voie cutanée (subchronique) = 8 mg/kg p.c. par jour d'après une réduction significative du nombre de plaquettes. Des doses de 8, 30, 125 ou 500 mg/kg p.c. par jour ont été appliquées sur le dos rasé de rats Sprague-Dawley mâles et femelles (10 animaux par sexe et par dose), à raison de 5 fois par semaine pendant 13 semaines. On a observé une augmentation du poids du foie chez les mâles et les femelles à une dose de 30 mg/kg p.c. par jour et de 125 mg/kg p.c. par jour, respectivement. À une dose de 30 mg/kg p.c. par jour (mâles) et de 125 mg/kg p.c. par jour (femelles), on a également observé une réduction liée à la dose du nombre de globules rouges, du taux d’hémoglobine, du taux d’hématocrite, du nombre de plaquettes et du poids du thymus, ainsi qu'une mortalité accrue (20 % pour les mâles et 80 % pour les femelles). Les deux sexes ont présenté une diminution du gain de poids corporel à 125 mg/kg p.c. par jour. Tous les rats mâles et femelles sont morts à des doses de 125 et 500 mg/kg p.c. par jour, respectivement (Mobil, 1988; Feuston et al., 1997).

Études par voie cutanée (chronique)

Des doses de 0, 250 ou 500 mg/kg p.c. (volume de 100 µL; substance à l'essai diluée dans l'acétone) ont été appliquées sur la peau rasée interscapulaire de souris B6C3F₁ (49 ou 50 animaux par dose), à raison de 5 fois par semaine pendant 103 semaines. Les souris exposées aux doses élevées ont été euthanasiées tôt en raison d'une grave irritation au site d'application. L'incidence des tumeurs de la peau chez les souris mâles (papillomes ou carcinomes malpighiens combinés) est survenue à la dose élevée au site d'application (0/49, 0/49 et 3/49 des souris présentaient des tumeurs, respectivement). Une incidence des tumeurs de la peau chez les souris femelles (carcinomes malpiphiens seulement) a été observée au site d'application (0/50, 1/45 et 2/48, respectivement). L'incidence des tumeurs du foie chez les souris mâles (adénomes ou carcinomes hépatocellulaires combinés) était de 9 sur 50, 17 sur 48 et 14 sur 49, respectivement. Une augmentation de l'incidence des tumeurs du foie chez les souris femelles (adénomes et carcinomes hépatocellulaires combinés) était de 4 sur 50, 4 sur 45 et 5 sur 50 (NTP, 1986).

Des doses de 0, 694 ou 1 111 mg/kg p.c. par jour (50 µL dilués à 50 % p/vc,e ou 100 % ^[c],^[f], respectivement) ont été appliquées sur la peau rasée interscapulaire de souris C3Hf/Bd mâles et femelles (15 animaux par sexe et par dose), à raison de 3 fois par semaine pendant 60 semaines. Parmi un grand groupe combiné (groupes de souris ayant reçu 1 ou 5 autres substances d'essai), 34 souris sur 360 ont développé des tumeurs cutanées. La répartition du nombre de souris ayant reçu la substance portant le n^o CAS 68476-31-3 et ayant développé des tumeurs n'était pas indiquée. Une des 60 souris exposées au témoin négatif présentait une tumeur de la peau (Easley et al., 1982).

Des doses de 8,4, 16,8, 42, 83,8 ou 167,6 mg/kg p.c. (25 μL d'huile clarifiée de craquage catalytique à une concentration de 1, 2, 5, 10 ou 20 % dans de l’huile minérale)^[c],^[f],^{Note de bas de page Annexe G Tableau G-1 [k]},^{Note de bas de page Annexe G Tableau G-1 [l]} ont été appliquées sur des souris mâles C3H (50 animaux par dose), à raison de 3 fois par semaine pendant toute leur vie. À une concentration de 1 %, 9 des 50 souris exposées à l’huile présentaient des tumeurs (4 carcinomes et 5 papillomes). À une concentration de 2 %, 34 des 50 souris exposées présentaient des tumeurs (30 carcinomes et 4 papillomes avec une période de latence de 92 semaines). À une concentration de 5 %, 46 des 50 souris exposées présentaient des tumeurs (46 carcinomes avec une période de latence de 61 semaines). À une concentration de 10 %, 48 des 50 souris exposées présentaient des tumeurs (47 carcinomes et 1 papillome avec une période de latence de 45 semaines). À une concentration de 20 %, 50 des 50 souris exposées présentaient des tumeurs (50 carcinomes avec une période de latence de 36 semaines). Des 610 souris soumises au témoin négatif (huile minérale très raffinée) de cette étude et de deux autres études similaires réalisées par les mêmes auteurs, seulement deux ont présenté des papillomes bénins et aucune n'a développé de carcinomes (McKee et al., 1990).

Études d’initiation et de promotion par voie cutanée :
 
Initiation : une dose de 16,8 mg/kg p.c. (50 μL d'huile clarifiée de craquage catalytique à une concentration de 1 % dans du toluène)^[c],^[f],^[l]a été appliquée à des groupes de souris CD mâles (30 souris par groupe) pendant 5 jours consécutifs. Après une période de repos de 2 semaines, on a appliqué le promoteur phorbol 12-myristate 13-acétate (PMA) 2 fois par semaine, pendant 25 semaines. On a observé une augmentation significative de l’incidence des tumeurs cutanées (26 des 30 souris exposées à l’huile présentaient des tumeurs après16 jours).
Promotion : on ne fournit aucun détail sur la méthodologie de l’étude. Aucune augmentation de l'incidence des tumeurs confirmées par examen histologique n'a été observée. Toutefois, on a observé une augmentation statistiquement significative du nombre de souris présentant des masses macroscopiques et des temps de latence réduits. Ces résultats laissent croire que la substance peut favoriser légèrement la formation de tumeurs (API, 1989).

DMENO pour la reproduction, par voie cutanée (femelles) : 1 mg/kg p.c. par jour d'après une diminution du nombre de fœtus vivants, une incidence accrue des cas de résorption, une augmentation des résorptions précoces et une augmentation du pourcentage de résorption ou de mort des conceptus par portée (ces effets, qui étaient liés à la dose administrée, ont été observés aux doses toxiques pour les mères). On a appliqué des doses de 0,05, 1,0, 10, 50 ou 250 mg/kg p.c. par jour sur la peau rasée du dos de rates CD gravides durant les jours de gestation 0 à 19. À une dose de 1 mg/kg p.c. par jour, on a observé une augmentation des variations fœtales associées à une diminution du poids corporel du fœtus, notamment une légère dilatation des ventricules latéraux du cerveau, une dilatation modérée du bassinet du rein, le corps des vertèbres thoraciques bifides et une diminution du nombre moyen de vertèbres caudales, de métacarpiens et de phalanges de pattes arrières ossifiés (ces effets sont des retards réversibles du développement). (Hoberman et al., 1995).

DMENO pour le développement, par voie cutanée = 8 mg/kg p.c. par jour d'après les anomalies fœtales externes. On a appliqué des doses de 4, 8, 30, 125 ou 250 mg/kg p.c. par jour sur la peau rasée du dos de rates Sprague-Dawley gravides (10 par dose) durant les jours de gestation 0 à 19 (la dose de 4 mg/kg p.c. par jour a été administrée en appliquant 8 mg/kg p.c. tous les deux jours). À la dose de 8 mg/kg p.c. par jour, on a observé des anomalies externes chez les fœtus vivants et morts, notamment la fente palatine, la micrognathie (développement incomplet de la mâchoire inférieure) et la queue déformée. On a aussi observé une incidence accrue des cas de résorption, une diminution du nombre de fœtus viables, une diminution de la taille des fœtus, des anomalies viscérales et des variations squelettiques à une dose de 30 mg/kg p.c. par jour. Aucun fœtus n'était viable à une dose de 250 mg/kg p.c. par jour (Feuston et al., 1989; Mobil, 1987^e).

Autre étude sur l'exposition par voie cutanée : On a appliqué des doses de 4, 8, 30, 125 ou 500 mg/kg p.c. par jour sur la peau rasée du dos de rates Sprague-Dawley gravides (15 par dose) durant les jours de gestation 0 à 19 (la dose de 4 mg/kg p.c. par jour a été administrée en appliquant 8 mg/kg p.c. à tous les deux jours). À une dose de 8 mg/kg p.c. par jour, on a observé une incidence accrue de cas de résorption et une diminution (statistiquement significative) du nombre de fœtus viables. À une dose de 30 mg/kg p.c. par jour, on a aussi observé une incidence accrue (statistiquement significative) des cas de résorption et une diminution du poids des fœtus. Enfin, on a observé une incidence accrue des anomalies externes, squelettiques et viscérales des fœtus (principalement des malformations des côtes et des fentes palatines) à une dose de 500 mg/kg p.c. par jour (Mobil, 1990; Feuston et al., 1997).

Autre étude sur l'exposition par voie cutanée : Des doses de 8, 30, 125 ou 500 mg/kg p.c. par jour ont été appliquées sur le dos rasé de rats Sprague-Dawley mâles (10 rats par dose), à raison de 5 fois par semaine pendant 13 semaines. On a observé une diminution du nombre de spermatozoïdes après 9 semaines d'exposition à une dose de 500 mg/kg p.c. par jour (Mobil, 1988; Feuston et al., 1997).

DMENO pour la reproduction et le développement, par voie orale = supérieur(e) ou égal(e) à 125 mg/kg d'après l'augmentation des cas de résorption, une diminution du poids corporel des fœtus et une incidence accrue de malformations squelettiques. Des rates Sprague-Dawley gravides se sont vu administrer une dose de 2 000 mg/kg p.c. durant une journée de leur gestation, soit des jours 11 à 14 (afin d'établir le profil des effets tératogènes en fonction du jour de gestation). De plus, des doses de 125, 500 ou 2 000 mg/kg ont été administrées au jour de gestation 12 (afin d'établir le profil des effets tératogènes en fonction de la dose). Les échantillons à l'étude étaient constitués de boues d'huile clarifiées et de résidus de tours à bruts synthétiques.
(1) Effets tératogènes par jour de gestation (2 000 mg/kg) : la plus forte incidence des cas de résorption ou de diminution de la taille des portées est survenue durant les jours de gestation 11 et 12. Le poids des fœtus a baissé pendant tous les jours de gestation. La plus forte incidence d’anomalies externes et de malformations viscérales des fœtus a été observée durant les jours de gestation 12 à 14, et 12 et 13, respectivement. Diverses malformations squelettiques des fœtus ont aussi été observées durant tous les jours de gestation.
(2) Effets tératogènes par dose (jour de gestation 12) : une réaction liée à la dose a été observée d’après l’augmentation des cas de résorption, la diminution de la taille des portées, la diminution du poids des fœtus et l’augmentation de l’incidence des malformations squelettiques des fœtus. Une variété d’anomalies externes des fœtus a aussi été observée à la dose de 2 000 mg/kg (Feuston et Mackerer, 1996).

Synthèse d'ADN non programmée
Des groupes de rats Fischer 344 mâles (3 rats par dose) se sont vu administrer, par gavage, une dose unique de 50, 200 ou 1 000 mg/kg p.c. de la substance d'essai, 2 ou 12 heures avant d'être euthanasiés. On a observé une augmentation significative de la synthèse d’ADN non programmée dans des cultures primaires d’hépatocytes à la dose de 200 mg/kg p.c. (après 12 heures seulement) et de 1 000 mg/kg p.c. (après 2 et 12 heures) [API, 1985a].

Échange de chromatides sœurs
Des groupes de souris B6C3F₁ mâles et femelles (5 animaux par sexe et par dose) ont reçu, par injection intrapéritonéale, une dose unique de 400, 2 000 ou 4 000 mg/kg p.c. de la substance d'essai. On a observé une augmentation importante de l'échange de chromatides sœurs et de la métaphase dans les cellules de la moelle osseuse à une dose supérieure ou égale à 2 000 mg/kg p.c. (mâles : P inférieur(e) à 0,05) et à 4 000 mg/kg p.c. (femelle : P inférieur(e) à 0,01). L'effet démontré suivait une tendance positive liée à la dose à toutes les concentrations (API, 1985b).

Mutagénicité
Les résultats liés à la substance d'essai étaient négatifs pour la S. typhimurium (souches TA1535, TA1537, TA98 et TA100) avec et sans activation métabolique par la fraction S9 (NTP, 1986).

Les résultats liés à la substance d'essai étaient négatifs pour laS. typhimurium (souche TA98), avec et sans activation métabolique par la fraction S9 (Schultz et al., 1981).

Inhibition de la transformation morphologique
Les résultats liés à la substance d'essai étaient négatifs pour les fibroblastes de prépuce humains infectés par le virus ST-FeSV, sans activation métabolique (Blakeslee et al., 1983).

Mutagénicité
La S. typhimurium (souches TA1535, TA1538, TA98 et TA100) a été exposée avec et sans activation métabolique par la fraction S9 (foie de rat traité à l'Aroclor 1254). Aucune mutagénicité n'a été observée (Vandermeulen et al., 1985).

La substance d'essai a également présenté des résultats négatifs dans le cadre de l'essai de mutation directe réalisé à l'aide de l'organisme Chlamydomonas reinhardtii(Vandermeulen et Lee, 1986).

Échange de chromatides sœurs
Des cellules ovariennes de hamster chinois ont été exposées avec et sans activation métabolique par la fraction S9 (foie de rat traité à l'Aroclor 1254). On n'a observé aucune augmentation de l’échange de chromatides sœurs (Farrow et al., 1983).

Essai sur lymphomes de souris
Des cellules L5178Y TK^+/- ont été exposées à la substance d'essai avec et sans activation métabolique par la fraction S9 (foie de rat traité à l'Aroclor 1254). La fréquence de mutation n'a pas augmenté (Farrow et al., 1983).

Synthèse d'ADN non programmée
Des cultures d'hépatocytes primaires de rats obtenues à partir de foies de rats F-344 mâles ont été exposées à des solutions d'huile pyrolytique aromatiquedans l'éthanol à des concentrations de 0,5, 2, 10 ou 60 μg/mL pendant 18 à 20 heures (sans activation métabolique par la fraction S9). On a observé une réponse liée à la concentration pour la synthèse d’ADN non programmée à une concentration supérieure ou égale à 2 μg/mL (Brecher et Goode, 1984).

Mutagénicité
Des cellules d'ovaire de hamster chinois ont été exposées à des solutions d'huile pyrolytique aromatique dans l'éthanol à des concentrations de 32, 64, 96, 128, 175 ou 256 μg/mL sans activation par la fraction S9 (foie de rat traité à l'Aroclor-1254) et de 128, 175, 256, 375, 512 ou 750 μg/mL avec activation par la fraction S9. L’essai a été répété à des concentrations de 500, 600 ou 750 μg/mL, avec activation métabolique par la fraction S9. On a observé une réduction du nombre de cellules à toutes les concentrations (avec et sans la fraction S9) et une toxicité importante à toutes les concentrations (avec la fraction S9). On a toutefois observé une augmentation de la fréquence de mutation à une concentration de 750 μg/mL avec une tendance linéaire liée à la concentration de mutation pour les concentrations les plus faibles. Lorsque l'essai a été répété, on a observé une augmentation de la fréquence des mutations à une concentration de 500 μg/mL (les concentrations plus élevées étaient toxiques). Aucun effet mutagène n’a été observé sans activation métabolique par la fraction S9 (Papciak et Goode, 1984).

Échange de chromatides sœurs
Des cellules d'ovaire de hamster chinois ont été exposées à la substance d'essai à des concentrations de 5 à 100 μg/mL sans activation métabolique par la fraction S9 et de 100 à 5 000 μg/mL avec activation métabolique par la fraction S9. On a observé une augmentation de l’échange de chromatides sœurs en présence d’activation métabolique. On n'a observé aucune augmentation de l’échange de chromatides sœurs sans activation métabolique (API, 1985^e).

Transformation cellulaire
Des cellules embryonnaires de souris BALB/3T3 ont été exposées à la substance d'essai à des concentrations de 1, 3, 6 et 9 μg/mL, sans activation métabolique par la fraction S9 (pendant 3 jours) et de 10, 30, 100 et 300 μg/mL avec activation métabolique par la fraction S9 (pendant 4 jours). La fraction S9 a été préparée à partir de foie de rat mâle traité avec de l’Aroclor. On a observé une augmentation de la fréquence de transformation à une concentration de 100 μg/mL après 4 heures. Le taux de survie était faible à la concentration de 300 μg/mL. Toutefois, on n'a observé aucune augmentation de la transformation morphologique sans activation (API, 1986b).